PDA培養基的配製方法和注意事項

2022-03-17 03:58:04 字數 1029 閱讀 9956

pda培養基是馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基的簡稱,即potato dextrose agar (medium),分別對應馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂的英文。它屬於固體培養基、半合成培養基。pda培養基宜於微生物生長發育、節省原料等優勢,一般在培養酵母菌、黴菌、蘑菇等真菌方面應用廣泛。

pda培養基的配製

(1)稱量和熬煮

按培養基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中,加水1000ml,在加熱器上加熱至沸騰,維持20-30min,用可用2層紗布趁熱在量杯上過濾,濾渣棄取。濾液補充水分到1000ml。

(2)加熱溶解

把濾液放入鍋中,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),然後放在石棉網上,小火加熱,並用玻棒不斷攪拌,以防瓊脂糊底或溢位,待瓊脂完全溶解後,再補充水分至所需量。

(3)分裝

按實訓要求,將配製的培養基分裝入試管或500ml三角瓶內。分裝時可用三角漏斗以免使培養基沾在管口或瓶口上造成汙染。

分裝量:固體培養基約為試管高度的1/5,滅菌後製成斜面,分裝入三角瓶內以不超過其容積的一半為宜;半固體培養基以試管高度的1/3為宜,滅菌後垂直待凝。

(4)加棉塞

培養基分裝完畢後,在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或試管帽等),以阻止外界微生物進入培養基內造成汙染,並保證有良好的通氣效能。

(5)包紮

加塞後,將全部試管用麻繩或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一層牛皮紙,以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞,其外再用一道線繩或橡皮筋扎好,用記號筆註明培養基名稱、組別、配製日期。

pda培養基配製注意事項

1.培養基經滅菌後,必須放在37c溫箱培養24h,無菌生長者方可使用。

培養基一般不需要調ph。對於要調節ph的培養基,一般用ph試紙測定其ph。如果培養基偏酸或偏鹼時,可用lmol/lnaoh或lmol/lhcl溶液進行調節。

調節時應逐滴加入naoh或hcl溶液,防止區域性過酸或過鹼破壞培養基成分。

3.培養基在使用時也可以做成不含瓊脂的液體培養基,用於菌類的**培養。

4.培養基也可以加入氯黴素或土黴素,加入量為0.2g/l培養基,主要是為了抑制細菌的生長,減少干擾性。

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