1 材料與方法
1. 1 實驗動物
spf級sd雄性大鼠39只, 10週齡, 體重180~200 g。
1. 2 試劑與高脂飼料配方
stz購自sigama公司, 膽固醇、膽酸鈉由上海藍季科技發展****提供。
高脂飼料配方: 2%膽固醇, 0. 3%三號膽鹽,20%蔗糖, 10%豬油, 67. 7%基礎飼料。
1. 3 動物分組與飼養
spf級雄性3週齡sd大鼠39只, 體重180g~200g, 適應性飼養一周後, 隨機分為正常對照組10只, 模型組34只。模型組大鼠禁食12h後, 單次腹腔注射35mg /kg的stz。stz用滅菌的0.
1mmo l/l, ph4. 4d的檸檬酸-檸檬酸鈉緩衝液配成2%溶液, 現配現用。正常組只注射等量的緩衝液。
72h後取尾靜脈血測空腹血糖高於7. 0mmo l/l 和餐後血糖均高於11. 1mmo l/l為糖尿病模型建立。
一次注射未成模, 立即仍按原劑量補注一次stz, 未成者淘汰,成模但緩解者淘汰。糖尿病大鼠成模後給予要付**，分別是藥物a+多醣1組（25ug/ml/天，灌胃給藥）10只；藥物b+多醣1組（25ug/ml/天，灌胃給藥）5只；藥物c+多醣1組（25ug/ml/天，灌胃給藥）5只；藥物a+多醣2組（25ug/ml/天，隨飲水給藥）5只；藥物b+多醣2組（25ug/ml/天，隨飲水給藥）5只；藥物c+多醣2組（25ug/ml/天，隨飲水給藥）5只；正常對照組（5只），多醣組和二甲雙胍組給予每天灌胃，七葉皂甙鈉組給予腹腔注射。除正常對照組外其他sd大鼠給予高脂高糖飼料餵養。
1. 4 標本採集
4週後，除取材組外，其他大鼠進行尾靜脈取血，約300微公升，30min後用3000r /min 離心15min, 分離血清。並且對糖尿病模型組3只，正常對照組1只進行取材（腎臟、胰腺、血管和心臟），動物稱重後，分別於空腹狀態下予水合氯醛麻醉（1ml/kg）,腹主動脈脈採血10ml, 30min後用3000r /min 離心15min, 分離血清。其他組織分為兩部分，一部分組織於-80°c凍存，另一部分組織生理鹽水清洗後，用4%多聚甲醛固定固定24h, 常規脫水包埋, 連續切片4μm, 切片固定於載玻片上, he染色,免疫組化，並進行光鏡觀察。
8週後正常對照組2只，糖尿病模型組3只進行尾靜脈取血，約300微公升，30min後用3000r /min 離心15min, 分離血清。其餘大鼠進行取材（腎臟、胰腺、血管和心臟），稱重後，分別於空腹狀態下予水合氯醛麻醉（1ml/kg）,腹主動脈脈採血10ml, 30min後用3000r /min 離心15min, 分離血清, 用於備檢胰島素含量。其他組織分為兩部分，一部分組織於-80°c凍存，另一部分組織生理鹽水清洗後，用4%多聚甲醛固定固定24h, 常規脫水包埋, 連續切片4μm, 切片固定於載玻片上, he染色,免疫組化，並進行光鏡觀察。
12週後對正常對照組2只和糖尿病模型組3只進行取材，稱重後，分別於空腹狀態下予水合氯醛麻醉（1ml/kg）,腹主動脈脈採血10ml, 30min後用3000r /min 離心15min, 分離血清, 用於備檢胰島素含量。其他組織分為兩部分，一部分組織於-80°c凍存，另一部分組織生理鹽水清洗後，用4%多聚甲醛固定固定24h, 常規脫水包埋, 連續切片4μm, 切片固定於載玻片上, he染色,免疫組化，並進行光鏡觀察。實驗結束時將各組動物處死。
糖尿病計畫
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xx縣xx鄉衛生院 2011年世界糖尿病日宣傳活動總結 我國糖尿病患病率在過去20年中上公升了4倍 2002年全國居民營養與健康狀況調查結果顯示,我國有糖尿病患者2000多萬人,另有近2000萬人糖耐量低減 據國際糖尿病聯盟估計,我國2007年糖尿病患病人數約為3980萬,2025年將達到5930萬...
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