重醫儀器分析考試

2022-08-22 05:45:06 字數 4925 閱讀 1126

臨床檢驗儀器(僅供參考)

1、臨床檢驗儀器常用的效能指標

(一)靈敏度; (二)誤差; (三)噪音;(四)最小檢測量;(五)精度;(六)可靠性;

(七)重複性;(八)解析度;(九)測量範圍和示值範圍;(十)線性範圍;

(十一)響應時間;(十二)頻率響應範圍。

2、(一)靈敏度

靈敏度指檢驗儀器在穩態下輸出量變化與輸入量變化之比,即檢驗儀器對單位濃度或質量的被檢物質通過檢測器時所產生的響應訊號值變化大小的反應能力,它反映儀器能夠檢測的最小被測量。當靈敏度為定值時,檢驗儀器系統為線性的。

(二)誤差

當對某物理量進行檢測時,所測得的數值與真值之間的差異稱為誤差(error)。誤差的大小反映了測量值對真值的偏離程度。

誤差通常有兩種表示方法。一是絕對誤差,它只能說明檢測結果偏離實際值的情況,但不能反映出檢測的準確程度 ;二是相對誤差,它是絕對誤差與被測量真值之比。相對誤差只有大小和符號無量綱,但它能反映檢測工作的精細程度。

(四)最小檢測量

指檢測儀器能確切反映的最小物質含量。儀表的靈敏度越大,在同樣的噪音水平時其最小檢測量越小。因此同一臺儀器對不同物質的最小檢測量也不一樣。在比較儀器的效能時,必須取相同的樣品。

(六)可靠性

可靠性指儀器在規定的時期內及在保持其執行指標不超限的情況下執行其功能的能力。是反映儀器是否耐用的一項綜合指標。

(七)重複性

重複性指在同一檢測方法和檢測條件(儀器、裝置、檢測者、環境條件)下,在乙個不長的時間間隔內,連續多次檢測同一引數,所得到的資料的分散程度。

重複性反映一台裝置固有誤差的精密度。對於某一引數的檢測結果,若重複性好,則表示該裝置精度穩定。

(八)解析度

解析度是儀器裝置能感覺、識別或探測的輸入量(或能產生、能響應的輸出量)的最小值。

解析度是儀器的乙個重要技術指標,它與精確度緊密相關,要提高檢驗儀器的檢測精密度,必須相應地提高其解析度。

(九)測量範圍和示值範圍

測量範圍指在允許誤差極限內儀器所能測出的被檢測值的範圍。檢測儀器指示的被檢測量值為示值;示值範圍指在儀器所顯示或指示的最小值到最大值的範圍。

示值範圍即儀器量程,量程大則儀器檢測效能好。

(十)線性範圍

線性範圍指輸入與輸出成正比例的範圍。在此範圍內,靈敏度保持定值。線性範圍越寬,則其量程越大,並且能保證一定的測量精度。

大部分臨床檢驗儀器所應用的原理都是非線性的,其線性度也是相對的。當所要求的檢測精度較低時,在一定的範圍內,可將非線性誤差較小的近似看作線性的,這會給檢測帶來極大的方便。

(十一)響應時間

響應時間表示從被檢測量發生變化到儀器給出正確示值所經歷的時間。一般來說,響應時間越短越好。如果作為自動控制訊號源,響應時間這個效能就顯得特別重要,因為儀器反映越快,控制才能越及時。

第二章顯微鏡技術和顯微鏡

光學顯微鏡(optical microscope)簡稱光鏡或顯微鏡,是一種將肉眼無法直接看清楚的微小物體進行光學放大像的常用儀器。

一、光學顯微鏡的工作原理

顯微鏡是由兩組會聚透鏡組成的光學折射成像系統。把焦距較短、靠近觀察物、成實像的透鏡組稱為物鏡(object lens),而焦距較長,靠近眼睛、成虛像的透鏡組稱為目鏡(ocular lens)。被觀察物體位於物鏡的前方,被物鏡作第一級放大後成一倒立實像,此實像再被目鏡作第二級放大, 得到最大放大效果的倒立的虛像,位於人眼的明視距離處。

二、光學顯微鏡的效能引數(相互間的關係和對具體操作的影響)

光學顯微鏡有放大率、數值孔徑、解析度、視野、景深、映象亮度、清晰度、工作距離和機械筒長等九個效能引數。放大倍數和解析度是兩個最基本的效能引數,都和na相關:放大率和na成正比,解析度和na成反比。

由於人眼的分辨極限在1'~2'的範圍,所以一般把顯微鏡的總放大倍率取在500na~1000na之間,稱為有效放大率。在實際應用中合理地綜合考慮各種技術引數的配置是必要的。

數值孔徑(numerical aperture)又叫鏡口率,是物體與物鏡間媒質的折射率n與物鏡孔徑角的一半(β)正弦值的乘積,通常縮寫為na,即na=nsinβ

顯微鏡的數值孔徑與其放大率成正比,與解析度、景深成反比,它的平方與影象亮度成正比。

解析度:顯微鏡的最重要引數,能夠區分開兩個質點的最小距離。

n與δ成反比,λ與δ成正比。光學顯微鏡的極限解析度約為0.22μm。

提高顯微鏡解析度的方法:

(1)增大物鏡的數值孔徑 :在物鏡和蓋玻片之間充以n 較大的油,如香柏油n =1.52,不僅使n 增大,而且孔徑角也增大。

(2)用短波長的光照射: 如紫外光顯微鏡,電子顯微鏡。

景深與焦長:景深(depth of field)又稱焦點深度,是指在成一幅清晰像的前提下,像平面不變,景物沿光軸前後移動的距離稱「景深」。

景物不動,像平面沿光軸前後移動的距離稱「焦長」。

工作距離是指從物鏡前表面中心到被觀察標本間滿足工作要求的距離範圍,與物鏡的數值孔徑成反比。一般情況下,物鏡的數值孔徑赿大,其工作距離赿小。

三、像差和色差(相差分類名稱)

(一)像差:實際的光學儀器不可能使物點發出而進入系統的所有光線都是沿著高斯光學的理想光路成像,從而導致成像在形狀方面的缺陷,稱之為像差。

1.球差(最常見) 2.彗差(broom aberration) 3.像散 4.場曲 5.畸變(distortion)

(二)色差:是一種由白光或複色光經透鏡成像時,會因各種色光存在著光程差而造成顏色不同、位置不重合、大小不一致的不同成像效果,從而造成像和物的較大失真。

色差分為的軸向色差(a)和垂軸色差(b)

四、光學顯微鏡的基本結構

①光學系統:目鏡、物鏡、反光鏡、聚光鏡

②機械系統:鏡座、鏡柱、鏡臂、鏡筒、調焦裝置、載物台(物鏡轉換器)

放大倍數:目鏡的放大倍數×物鏡的放大倍數

(一)光學系統

1.1 物鏡

物鏡除滿足光學成像質量外,還需滿足:

①同一臺顯微鏡配用的一套物鏡必須滿足「齊焦」要求。所謂「齊焦」,就是當某一物鏡調焦清晰後,變換物鏡轉換臺的其它物鏡時,能基本保證調焦適當,成像清晰。

②凡物鏡外殼上刻有蓋波片厚度的,需要配用規定厚度的蓋玻片。

③對物鏡的細紋尺寸均採用同一規格,以利互換使用。

物鏡的技術引數使用特定的字元標示在鏡頭外殼上。浸式都註明使用的浸液,上面一行用β/na的形式給出物鏡的放大倍數β和數值孔徑na,下面一行以l/b的形式給出適用的鏡筒長及蓋玻片厚度b。 例如:

物鏡外殼有下列標記「油-100/1.25—∞/0.17」,則表明該物鏡為油浸式高倍,放大倍數為100,na為1.

25,對透射光及反射光均適用,鏡筒長為很大,在用於透射光時的蓋玻片厚度為0.17mm。

1.2目鏡

顯微鏡的目鏡是在窄光束、大視場的條件下工作的,實際上起的是放大鏡的作用。要注意目鏡應該滿足「三面重合」的要求。在目鏡的物方焦平面上設有限制物方視場的光闌,物鏡所成放大的實像就成在光闌面上,用於觀測的目鏡上的分劃板和目鏡指標也安置在該光闌面上,稱「三面重合」。

2.顯微鏡的照明系統(知道用在什麼顯微鏡上)

用顯微鏡觀測和研究的物體,大多為自身並不發光的標本。為了看清楚標本不僅需要顯微鏡有足夠的放大倍數和解析度,還需要能使實驗標本有充分的反差和均勻的亮度的適宜照明。

根據聚光器和光源的使用方式不同可分為:

●反射照明:低檔普通生物顯微鏡僅使用凹面反射鏡反射自然光而不經聚光器直接給標本照明。也有使用聚光器的,同時使用凹面或平面反射鏡,但光源是自然光。

●臨界照明:使用電光源,照明光經聚光器後再照亮標本。由於光源經聚光器透鏡所成的像是和標本所在平面近於重合,既影響觀察又可能會因像的亮度的不均勻使標本的照明不均勻。

儘管它有著這樣的缺點,但因有結構簡單的優勢而用於普通顯微鏡。

● 柯拉照明:可以克服臨界照明的缺陷,保證標本的均勻照明。這是一種用在透射光與亮視場中的標準照明方式。這種照明方式使物平面界限清晰、照明均勻,效果比較滿意。

根據照明光透過物體進入物鏡形成的反差型別分為:

●明視場法 ●暗視場法 ●斜照明法

照明系統主要部件:(知道主要部件名稱)

光源:分為自然光源和電光源二大類

玻片:上面一片稱蓋玻片,下面一片為載玻片

(二)機械系統

機械系統:鏡座、鏡柱、鏡臂、鏡筒、調焦裝置、載物台(物鏡轉換器) 。。。(知道名稱)

物鏡轉換器:是機械裝置中結構複雜、精度要求最高的核心元件。視場小,要求轉換器和物鏡定位槽孔對中準確度不低於0.

01mm,對顯微鏡軸和鏡筒基準端麵的垂直度、在調焦過程中位移的平行度等方面都有嚴格的要求。保證 「齊焦」。

調焦系統: 調焦的目的:為了充分利用放大倍數和保證清晰成像條件。

調焦的基本要求:所調節系統沿著光軸方向做穩定的直線運動。調焦可以有二種途徑:

一是公升降鏡筒移動物鏡,二是公升降載物台移動標本。無論哪種方式都包括微動調焦(微調)和粗動調焦(粗調)兩套機構。一般操作時,先粗調迅速地得到標本的像後再仔細微調獲得滿意的物像.

螢光顯微鏡(名解) :是以紫外線為光源來激發生物標本中的螢光物質,產生能觀察到各種顏色螢光的一種光學顯微鏡。利用它可研究螢光物質在組織和細胞內的分布。

顯微鏡拆裝的注意事項:

拆裝前應該認真閱讀說明書,看清裝配圖,參照以下的原則進行。

(1)依照先光學部件後機械部件的順序進行拆卸。

(2)光學部件的拆卸要按自下而上的順序進行。

(3)組裝的順序恰好與拆卸的順序相反。

(4)在拆裝過程中必須牢記部件之間的組裝關係,避免錯漏。

(5)在拆裝過程中,零部件要拿穩、放置要到位,順勢自然,緊固要適中,不可強裝強卸。

(6)注意保護光學元件不受損受汙,機械配合面避免損傷、汙染。

第五章色譜分析技術和色譜分析儀器(每個系統要求、重要物件要求)

一、色譜法概述

色譜法(chromatography)是一種物理分離技術,實質上是利用混合物中各個組分在互不相溶的兩相(固定相和流動相)之間的分配的差異而使混合物得到分離的一種方法,也有人稱之為色層法、層析法等。

色譜儀(chromatograph)的實質是利用色譜分離技術再加上檢測技術,對混合物進行先分離後檢測,從而實現對多組分的複雜混合物進行定性、定量分析。

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