jesse wang
2010-04
前一天的準備工作
1) 清洗4個小燒杯，玻璃板，梳子，晾乾。
2) 清洗若干玻璃培養皿、6個15ml離心管，1個50ml離心管，烘乾。
3) 檢查電泳緩衝液、轉膜緩衝液和tbst是否足夠。
電泳：1. 籃子
2. 10微公升的槍和槍頭
3. 冰
4. 蛋白樣品，marker
5. 廢液缸
6. 手套
7. 電泳緩衝液
轉膜：1. 清洗轉移槽，夾子，海綿。
2. 刀片，剪刀，鉛筆，直尺，玻棒，鑷子，大張濾紙，手套。
3. 轉膜緩衝液
4. 一大盒冰
5. 甲醇
6. 培養皿(3~4個)
封閉：1． 奶粉1克
2． tbst 20ml
3． 50ml離心管
4． 培養皿
一抗和二抗孵育
1. 抗體
2. 15ml離心管
3. 培養皿
4. tbst
5. 藍色ep管架
6. 離心管架
化學發光、顯影和定影
1. 剪刀，用濾紙剪好的模板（長和寬均比pvdf膜大1cm），一張濾紙（吸pvdf膜上的殘液）。
2. 膠片，顯影液和定影液。
3. 三個培養皿（兩個用來裝顯影和定影液，乙個裝發光底物，預先把蒸餾水加好）
4. 塑料板夾，雙層透明薄膜，兩張白紙（這些都是壓片時用的）
5. 200微公升的槍和槍頭（加ecl的a液和b液時用）100ul +100ul +3.0ml水。
6. 計時器
7. 鑷子，廢液缸。晾乾膠片用的架子。面巾紙若干張。
步驟：剪膠片（3至4張）----加ecl發光底物----顯色1至5分鐘------壓片（30秒至2分鐘）----
顯影（有條帶出現即可終止）-----水洗-----定影（2到3分鐘，時間長點也無所謂）-----水洗
-----晾乾------凝膠成像儀中拍照----收拾檯面。（完）
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