種子發芽實驗

2022-10-16 08:42:05 字數 3182 閱讀 9141

實驗五種子發芽測定

一、目的要求

測定種子的發芽能力,是為了確定播種量和乙個種批的等級價值。要求掌握種子發芽測定的操作技術,並學會計算種子發芽的各種質量指標。

二、材料器具

1.材料本地區主要園林樹種的種子3~5種。

2.器具及藥品恆溫箱、培養皿、濾紙、紗布、脫脂棉、鑷子、溫度計(0~100℃)、取樣匙、直尺、量筒、燒杯、****、高錳酸鉀、標籤、電爐、蒸煮鍋、蒸餾水、滴瓶、解剖刀、解剖針等。

三、方法步驟

1.測定樣品的提取用十字區分法從測定淨度時選出的純淨種子每個三角形中數取25粒種子組成100粒。共組成四個100粒,成為四次重複,分別裝入紗布袋中。

種粒大的可以50粒或25粒為一次重複,樣品數量有限或裝置條件不足時,也可以採用三次重複,但應在檢驗證中註明。

樺屬、桉屬、楊屬、柳屬等細粒種子是從純淨種子中稱量大約0.25克作測定樣品,稱量精度至毫克。

2.消毒滅菌為了預防黴菌感染,干擾檢驗結果,檢驗所使用的種子和各種物件一般都要經過消毒滅菌處理。

① 檢驗用具的消毒滅菌:培養皿、紗布、小鑷子仔細洗淨,並用沸水煮5~10分鐘。供發芽試驗用的恆溫箱用噴霧器噴灑****後密封兩三天然後使用。

② 種子的消毒滅菌:目前常用的有****、高錳酸鉀、公升汞、過氧化氫等。藥劑種類不同,處理的方法和時間也不一致。

****將紗布袋連同其中的種子測定樣品放入小燒杯中。注入0.15%的****溶液,以浸沒種子為度,隨即蓋好燒杯。

20分鐘取出絞乾,置於有蓋的玻皿中悶半小時,取出後連同紗布用清水沖洗數次。即可進行浸種處理。

高錳酸鉀用0.2~0.5%的高錳酸鉀溶液浸2小時,取出用清水沖洗數次。

3.浸種羅漢松、側柏、水杉、黃連木、胡枝子等。用始溫為45℃水浸種24小時。刺槐種子用80~90℃熱水浸種,待水冷後放置24小時,浸種所用的水最好更換1~2次。

楊、柳、桉等則不必浸種。

4.置床將經過消毒滅菌、浸種的種子安放到發芽床上。視樹種而不同,常用的發芽床有紗布、濾紙或細砂。一般中粒、小粒種可在培養皿中放上紗布或濾紙作床。

在每個培養皿床上整齊地安放100粒種子(種粒較大的可為50粒乃至25粒),種粒之同保持的距離大約相當於種粒本身的1~4倍,以減少黴菌蔓延感染,並避免發芽的幼根相互糾纏。種粒的排放應有一定規則,以便計數並減少錯誤。

在培養皿不易磨損的地方(例如底盤的外緣)貼上小標籤,寫明送檢樣品號、重複號、姓名和置床日,以免錯亂。然後將培養皿蓋好放入指定的恆溫箱內。根據樹種的特性使用變溫或恆溫(參見表4-1)。

規定使用變溫的,每晝夜應當保持低溫16小時,高溫8小時,溫度的變換應在三小時以內逐漸完成。濕度為60~70%

表4-1 部分樹種發芽測定的主要技術規定

5.發芽測定的管理

(1)經常檢查發芽環境的溫度,儀器的溫度同預定的溫度相差不能超過±1℃。

(2)保持發芽床的水分水分不足進應及時加水。但水分也不能過多,用指尖輕壓發芽床(指紙床),如指尖周圍出現水膜,或者種粒四周出現水膜,都表示水分過多。

(3)通氣種子發芽需要足夠的氧氣,並會釋放出大量的二氣化碳。有蓋的培養皿的缺點之一就是通氣不良,應當經常揭開蓋子充分換氣。

(4)將感染黴菌的種子取出(不要使它們觸及健康的種粒),用清水沖洗數次,直到水無混濁再放回發芽床。發霉嚴重時整個濾紙和座墊,甚至整個培養皿都要更換。這些情況在發芽記錄表(表4-2)中應有記述。

6.觀察記載

(1)發芽測定的情況要定期觀察記載(見表4-2)。為了更好地掌握發芽測定的全過程,本實驗最好要求每天作一次觀察記載。

(2)發芽測定的持續時間發芽測定的持續天數見表4-1。表中所列天數以置床之日為零起算,且不包括種子預處理的時間。如果確認某樣品已經達到最高發芽率,也可在規定的時間以前結束測定。

如到規定的結束時間仍有較多的種粒萌發,也可酌情延長測定時間。發芽測定所用的實際天數應在檢驗報告中填明。

(3)記載專案按發芽床的編號依次記載以下各點(見表4-2)。

表4-2 發芽測定記錄表

檢驗員年月日

表4-3 發芽測定結果統計表

樹種送檢樣品號測定開始日期結束日期

檢驗員年月日

正常發芽粒——長出正常胚根。其長度大於該種粒一半的稱為正常發芽粒。對楊、柳、桑、桉等細粒種子,胚根的長度應不少於該種粒的長度。

竹類種子正常發芽粒的幼根應至少同該種粒等長且幼芽的長度超過該種粒長度的二分之一。苦楝、柚木等復粒種子,其中只要有一粒種子正常發芽即可作為正常發芽率。凡符合正常發芽粒種子用小鑷子取出記數。

異狀發芽粒——指胚根短而生長遲滯、胚根呈負向地性;胚根異常纖弱;胚根腐壞;胚根出自珠孔以外的部位;種殼暴烈或脫落;胚根捲曲;子葉先出;胚根聯結。有時需將一時難於判斷的發芽粒特別提出另行培養,以便確定是否為正常發芽。

腐爛粒——內含物腐敗成膠狀的無生命種子稱腐爛粒。應及時提出並在**中記述,但不能把感染黴菌的種子混同為腐爛粒。

未發芽粒——每次剔除發芽粒、異狀發芽粒和腐爛粒之後將餘下的未發芽粒重新排放整齊,並點數,以便及時核查,避免差錯。到發芽終止日期後,分組用切開法對尚未發芽的種粒進行補充鑑定,分別歸成新鮮健全粒、腐爛粒、空粒、澀粒(多見於杉木、柳杉)等幾類並記入表4-3。

7.計算發芽結果

發芽測定結果,進行以下各項指標的計算,並記入表4-3。

(1)發芽率(實驗室發芽率、技術發芽率)

發芽率(%)=

式中:n——正常發芽粒數

n——供檢種子總數

發芽率計算到小數點後一位,以下四捨五入。

發芽率按組計算,然後計算四組的算術平均值。其值不帶小數。組間的容許誤差見表4-4a。如果沒有超過容許誤差,實驗結果可以認為是正確的,即以四組的平均百分數作為本次試驗的結果

表4-4a 發芽百分率的最大容許差距,用以決定是否要重做測定:只考慮隨機取樣的變異

如果超過容許的誤差範圍,則測定結果認為不正確,需進行第二次測定。第二次測定(也可以與第一次測定同時做)和第一次測定的結果來計算兩次的平均發芽率,以兩次測定平均發芽率來查表4-4b,如兩次的結果相差不超過該錶所規定的容許差距,則測定是符合要求的。如超過容許誤差,則應再做測定。

(2)發芽勢

在規定時間(見表4-1,一般是發芽達到高峰以前)內正常發芽種子數與供

檢種子數的百分比。按分組計算,然後求四組的平均值。計算到小數點後一位。其容許誤差為計算發芽率時容許誤差的一倍半。

表4-4b 判斷兩次測定是否符合的容許差距只考慮隨機取樣的變異

(3)絕對發芽率

把供檢樣品中的空粒和澀粒除去不計,只計算飽滿種子的發芽率。

絕對發芽率(%)=

式中:n——正常發芽的種數

n——供檢種子總數

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