1 目的
規範檢定菌的管理制度，保證菌種的正常。
2 範圍
化驗室使用的菌種。
3 責任
化驗室主管、化驗員。
4 制度
4.1 菌種的購買和接收
4.1.1 檢定菌應到中國藥品生物製品檢定所或當地藥檢所購買。
4.1.2 檢定菌應設專人保管，此人應受過專業培訓，有足夠的菌種儲存經驗。
4.1.3 接收菌種時，應核實菌種的名稱、編號、形態特徵等，並調查清楚菌種的儲存條件和注意事項。
4.1.4 填寫菌種接收登記表。內容有：菌種名稱、菌種編號、菌種批號、購買日期、菌種**等。
4.2 菌種儲存
4.2.1 菌種上應貼上明顯的標籤，標明名稱、編號、購買日期等。
4.2.2 菌種保藏分四個階段：
①挑選特徵典型的純菌菌落；②確定保藏的合適菌體形態，孢子和芽胞代謝作用較弱，同時對惡劣環境有很強的抵抗力，因此對凡是能產生孢子或芽胞的微生物都用孢子和芽胞進行保藏；③選擇最適宜的保藏法進行保藏；④定期對保藏菌種進行檢查，觀察是否發生變化，若有變化，需改變保藏方法，保藏期滿應及時進行移種。
4.2.3菌種復甦參考方法：
幹菌種（0代）用100ml液體培養基復甦（1代），加入100ml40%無菌甘油，混勻，小量分裝，於-20℃冷凍儲存。每次使用取一支自然（室溫）解凍，取0.1ml接種至10ml液體培養基，按規定培養、稀釋（2代）。
解凍後的菌種不能重複冷凍，傳代後應進行滅活。
4.2.4一般採用瓊脂斜面低溫保藏法：將經常使用的菌種的典型菌落接種在新鮮的瓊脂
斜面、液體或半固體培養基中，按規定的溫度和時間培養，待充分生長後，把培養好的新鮮菌種管用牛皮紙包好，為減緩培養基的水分蒸發，延長保藏時間，可將菌種保藏管的棉花塞換成無菌橡膠塞，放在4℃左右的冰箱內保藏。本法適用於經常使用的細菌、酵母菌、放線菌和黴菌保藏，各類菌種保藏條件及時間見附表1：各類細菌保藏條件與
時限4.2.5 每天檢查一次儲存菌種的冰箱溫度，並作記錄，每週檢查菌種管的棉塞是否鬆動，菌種外觀及乾燥狀態，如有異常應及時處理，並填寫菌種檢查記錄。
4.2.6 每次移植培養後，要與原種的編號、名稱逐一核對，確認培養特徵和溫度無誤後，再繼續儲存。
4.3 菌種的傳代、接種和使用
4.3.1 每株菌種應建立菌種使用及傳代記錄，斜面菌種應根據其特性決定傳代時間間隔，細菌一般乙個月，其它見附表1：各類菌種儲存溫度與時限。
4.3.2 傳代時使用須核對名稱、編號，傳代代數及日期，所用培養基。
4.3.3 傳代和接種規程
4.3.3.1 先點燃酒精燈，在火焰旁的上部空間操作，燒灼接種環。
4.3.3.
2 再將原有的菌種斜面培養基（簡稱菌種管）與待接種的新鮮斜面培養基（簡稱接種管），持在左手拇指、食指及中指之間，要注意能清楚地觀察到斜面，菌種管在前，接種管在後，應斜持試管呈45°角，使試管內斜面向上，兩試管口平齊，注意不要持成水平，以免管底凝集水浸濕培養基表面。
4.3.3.
3 首先，以右手在火焰旁轉動兩管的棉塞，以便接種時易於拔取。再以右手持接種環的柄端，垂直或稍斜地把接種環在火焰上燒灼。頂端的環必須燒紅，以徹底滅菌。
環以上凡接種時可進入試管的部分，也應通過火焰燒灼。燒灼時，應把環置於酒精燈的外焰上，因外焰的濃度比內焰高，容易燒紅。
4.3.3.4 使用右手的小指和手掌之間以及無名指與小指之間，在火焰旁分別拔出兩支試管的棉塞，持住，再將試管口在火焰上通過，以殺滅管口可能沾汙的細菌，但勿燒燙。
4.3.3.
5 先將燒灼過的接種環插入菌種管內，先接觸無菌苔生長的培養基土，如有熔印則表明接種環未冷卻能燙死細菌。一定待冷後，再從斜面上挑取菌苔少許，取出時接種環不能通過火焰，應從火焰旁迅速插入接種管，在斜面上輕輕劃線接種。劃線時，一般先由下而上劃一直線後，再由下而上劃曲線。
操作過程應迅速，勿使菌苔粘至管壁或管口。
4.3.3.
6 當接種完畢，立即將管口通過火焰滅菌，右手到火焰旁塞上棉塞，不要將管口離**焰旁去迎接右手的棉塞。最後將接種環燒灼滅菌放置原處，再把可能未塞緊的棉塞塞緊，即可進行培養。
4.3.3.
7 操作過程中，如因不慎使棉塞觸及火焰而著火，卻勿用口吹，須在剛剛著火時迅速塞入試管，因管內氧氣不足會很快熄滅。若棉塞外端著火，可用手捏熄。若棉塞燒壞不宜再用，可另取未接種斜面培養基上的滅菌棉塞，代替塞上。
4.3.3.8 傳代和接種使用後，應填寫檢定菌種接收、傳代登記表及檢定菌使用記錄。
4.3.4 控制傳代次數，傳代次數越多，突變的機率越大，因此要盡量少傳代；根據菌種特性和實際儲存情況，一般最多傳代不超過5代，超過此次數，應加熱滅活。
4.3.5 做完抗生素微生物檢定後試驗用的菌液以及測量完抑菌圈後的培養皿，陽性菌對照廢棄物，要滅活處理。
4.3.6 菌種有異常情況或有雜菌生長，則應隨時更代，並可在傳代中，選擇典型菌種作傳代菌種。
附：檢定菌種接收、傳代登記表（編碼：jl-zl-142 ）
菌種檢查記錄（編碼：jl-zl-143（1） ）
檢定菌使用記錄（編碼：jl-zl-143（2） ）
附表1：各類細菌保藏條件與時限
檢定菌種接、傳代登記表
jl-zl-142 01
菌種檢查記錄
jl-zl-143（1） 02
檢定菌使用記錄
jl-zl-143（2） 02
檢定菌管理制度
1.目的 規範檢定菌的管理制度，保證菌種的正常。2.適用範圍 實驗室使用的菌種 3.責任 實驗室檢驗員和實驗室主任。4.內容 4.1 菌種的購買和接收 4.1.1 檢定菌應到中國藥品生物製品檢定所或當地藥檢所購買。4.1.2 檢定菌應設專人保管，此人應受過專業培訓，有足夠的菌種儲存經驗。4.1.3 ...
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