技術部新入職員工考核試卷

技術部新入職員工培訓考核試卷（開卷）

姓名考試時間成績

一、填空題（每題1分，共40分）

1、實時螢光定量pcr（real-time pcr）是

2、pcr一般包括三個階段。

3、基線是4、閾值是

5、ct值是

6、螢光pcr實驗室一般分為三個區。

7、稀釋樣本時，先加、後加，吹打均勻後再依次從上乙個濃度稀釋到下乙個濃度。

a.水 b.滅菌的超純水 c.樣本 d. 質粒

8、螢光pcr上機時，切不可用記號筆在標記，已標記的應在放入儀器前擦拭乾淨，並在儀器相應的孔上對樣本資訊進行記錄。上機後，預計實驗結束的時間，等實驗結束應及時關機，並清理儀器裡，用一次性手套封好，切忌在實驗室內避免氣溶膠汙染。

9、配製pcr反應液時，避免 pcr管蓋或8連管蓋，其一般為光學平蓋或光學膜，被汙染極可能導致結果異常而影響判斷。

10、禁止攜帶等陽性樣本進入配液室。

11、使用液體，或是使用材料時，必須在生物安全櫃或通風櫥內進行。

12、螢光pcr試劑盒一般包括三個組分。

13、進行螢光pcr實驗過程中要注意以下細節：

1）實驗過程中實驗員要穿、戴、戴；2）用槍要，取液加液不能過快；3）樣本標記要清晰，離心管要；4）抽提核酸的廢棄耗材要用消毒水浸泡處理，裝有消毒水的廢液缸快滿時要及時處理，並加適量的於廢液缸內，實驗完成後要及時清理桌面。

14、螢光pcr實驗室汙染考慮有以下幾個方面，分別為

等造成的汙染。

15、目前real-time q-pcr所使用的螢光化學方法主要有、

二、簡答題

1、以taqman螢光探針為基礎的實時螢光pcr技術，目前在國內臨床診斷中應用最為廣泛，taqman螢光探針檢測原理。下圖為據回答問題：（30分）

（1）此圖r表示的是q表示的是

（2）圖中以dna是以為模板，在pcr_ 階段形成單鏈dna，

在酶的作用下合成雙鏈dna，從而獲得了所需要的基因。

（3）實時檢測pcr在擴增過程中可分為

四個階段。

（4）普通pcr是在pcr結束後對_ 進行定量分析，實時檢測pcr擴增，在擴增的指數期對_ 進行定量。

（5）和普通pcr相比，螢光pcr有哪些優勢？（10）

2、2023年，科學家將動物體內的能夠合成胰島素的基因與大腸桿菌的dna分子重組，並且在大腸桿菌體內表達成功。請根據圖回答問題：（15分）

（1）此圖表示的是採取從中獲取目的基因的過程。

（2）圖中①dna是以為模板形成單鏈dna，在酶的作用下合成雙鏈dna，從而獲得了所需要的基因。

（3）圖中②代表的是在它的作用下將質粒（ dna）切出末端。

（4）圖中③代表__ __dna，含目的基因。

（5）圖中④表示表示__ __dna隨大腸桿菌的繁殖而進行 ___。

三．論述題

1.、試述pcr技術的基本原理，如果想通過pcr技術從乙個生物基因組中擴增乙個約500bp的基因片段，再和載體連線轉殖，然後轉入大腸桿菌中，請描述其轉殖過程（包括檢測）。（15分）