09生科2班曾振傑 108012009066
【摘要】：以豌豆根尖為材料，研究果蔬洗潔精對豌豆根尖細胞的遺傳毒性．利用不同濃度的果蔬洗潔精為誘變劑，測定豌豆根尖細胞的微核率和染色體畸變率．結果：不同濃度的果蔬洗潔精能誘發較高頻率的微核，有一定的遺傳毒性。
【關鍵詞】：微核、豌豆根尖細胞、果蔬洗潔精。
【abstracts】：in this ***** ,the cytotoxicity of detergent on root—tip cells of pisum sativum was investigated by using micronucleus shows that the detergents in different concentrations can cause obvious micronucleus effect.
【key words】：micronucleus、root—tip cells of pisum sativum、detergent。
1.前言：
蠶豆根尖微核技術作為植物微核檢測系統，已被廣泛應用於環境誘變因子的研究，尤其是環境汙染的檢測。如今，隨著人們生活水平的提高，各種各樣的洗滌劑出現在市場上．面對令人眼花繚亂的洗滌劑，人們在選用時不僅要求它的效果一流，同時也希望它不會對生態環境造成破壞．國內一些學者選用化學試劑對蠶豆根尖細胞的毒性效應進行了研究；佟鳳琴等以蠶豆根尖細胞微核率為指標，對美雅和白貓洗滌劑的遺傳安全性進行評價，從而證明洗滌劑對蠶豆根尖細胞具有明顯的誘變作用。
2.方法與步驟：
2.1 材料
豌豆種子
2.1試劑與儀器
試劑：蒸餾水，果蔬洗潔精，鹽酸(1 0％)，卡諾氏固定液(無水乙醇和冰醋酸按3 ： 1配製而成)，解離液(鹽酸和無水乙醇按1 ：1配製成)。
儀器：顯微鏡，鑷子，載玻片，蓋玻片，燒杯培養皿，移液管，量筒。
2.2藥品的配製
2.21 固定液的配製
固定液的重要特性是能迅速穿透細胞，將其固定並維持染色體結構的完整性，還要能夠增強染色體的嗜鹼性，達到優良染色效果。單純的固定液一般難以達到這些要求，因此在實驗中使用兩種混和的固定液。卡諾氏固定液是效果良好的固定液。
carnoy 固定液（無水乙醇：冰醋酸=3：l）每次使用前均為臨時配製。
實驗中可根據需要適當改變無水乙醇和冰醋酸的比例，冰醋酸比例增加，利於細胞膨脹和染色體鋪展，但易導致細胞破裂以及染色體散失。
2.3實驗步驟
2.31豌豆根尖的培養
選擇新鮮、飽滿、大小均勻的豌豆，用蒸餾水浸泡 1 d ，讓其吸脹，期間換 2 ～3次水 ， 待豌豆吸水脹大後，揀去霉爛變質的豌豆．然後鋪展在墊有溼紗布的培養皿中，蓋上溼紗布，於22℃下培養 2 d，切去主根，繼續培養2-3天，側根可長至1 c m。
2.32誘變處理
待根長至1 c m左右，取根長基本一致的豌豆幼苗隨機分組，各組濃度梯度分別為洗潔精稀釋25、50、100、150倍，蒸餾水作為對照處理，處理20 h，誘變處理後，用蒸餾水浸洗 3次，每次 2 —3 mi n ，將洗潔精洗淨後，用蒸餾水繼續培養24 h，以便前期藥劑處理中受到損傷的細胞核有充足的**時間，最終以微核的形式出現。
2.33固定
將恢復培養後的根尖切下來，用卡諾氏固定液固定4 h左右。固定後用90%、80%、70%的酒精洗脫（固定後的根如不及時製片，可置7 0％的乙醇溶液中於 4℃冰箱中儲存備用。）
2.34 酸解
用蒸餾水清洗固定好的幼根兩次，每次5min，吸盡蒸餾水後，加入解離液將幼根浸沒，室溫下酸解10min左右，至根尖軟化。
2.35． 染色
吸去解離液，用蒸餾水清洗固定好的幼根3次，每次1—2分鐘，然後將清洗好的幼根浸於蒸餾水中，取一根固定好的幼根，放於載玻片上，滴改良石碳酸品紅染液，染色15分鐘左右，加蓋玻片。
2.36 觀察
常規壓片鏡檢，觀察不同處理及對照的微核，並統計細胞微核( mcn)。
計算：每組觀察5個根尖，分別計算每個根尖的微核千分率。微核( fmn ‰)= 微核數／1000個細胞。
3、結果與分析
資料處理
表2不同濃度處理微核率差異顯著表（lsd法）
( 注：*代表 p< 0.05，**代表p< 0.01 )
3.1細胞觀察:細胞中的微核
3.2討論
洗滌劑中的有害成分被豌豆吸收，使得豌豆根尖細胞有絲**異常，細胞染色體發生斷裂，斷裂殘留在細胞質中濃縮成微核。紡錘體致變物中也可導致染色體分離異常，使細胞**時誘發不分離現象或產生非整倍體子代細胞，使得染色體或多條染色體殘留在赤道板附近形成滯後染色體而形成大微核。從微核大小可以反映機體細胞染色體受損傷的程度。
實驗結果表明，不同濃度的果蔬洗潔精能誘發較高頻率的微核，有一定的遺傳毒性。所以我們應該慎用洗潔精，不要過量使用。
參考文獻
立白洗潔精配方
配方 1 1.磺酸鈉 4kg 2.6502 6kg 3.檸檬酸適量 4.香精 檸檬or香蕉 適量 5.水 90kg 共 100kg a 磺酸鈉 6502 20k 溶解後，加檸檬酸調ph值 9 10 b 加70k 加香精 檸檬or香蕉 攪勻 配方 2 磺酸 9 10 naoh 中和磺酸至ph7 8 a...
透明瓶的洗潔精看出立白洗潔精的創新
作為人們日常生活中的必備品，洗潔精似乎在每個家庭都扮演著重要的角色。但是，隨著洗潔精市場的逐漸飽和，洗潔精的發展也似乎走進了乙個瓶頸。許多品牌都不再將生產重點放在洗潔精產品上，而是轉而投向其他各類日化用品，導致洗潔精產品幾十年來幾乎無大創新。然而，隨著消費水平和知識觀念的提高，如今消費者對於日常用品...
洗潔精物質安全表
第一部分 製造商或 商資料 化學品中文名稱 洗潔精 企業名稱 奇強精細化工 香港 位址 香港灣仔莊士敦道181號大有大廈1001室傳真號碼 0085230458092 第二部分 成份 組成資訊 混合物，光基歐磷光酸 甘油。第三部分 危險性表述 危險性類別 不燃。侵入途徑 吸入 食入。健康危害 未發現...