實驗三酵母核糖核酸的提取及測定預習報告

2022-03-15 05:07:10 字數 1578 閱讀 3033

預習思考題

答:我認為作為商品開發,更多的應該是考慮需求的共性,尤其是市場開發前期,只有更多的考慮市場需求共性,符合消費群體的需求,產品才能推廣開,在市場發展相對穩定時,可再根據不同的消費人群制定相關個性產品。完成產品的定位,需要先做市場調研,從已有的產品入手,調查產品的需求程度,主要消費群體,市場份額等,根據調研報告進一步定位產品。

2. 基於生物製藥的產業開發,**實驗室的科學研究和大工業生產之間的關係和異同之處?

答:實驗室的科學研究是大工業生產的基礎和必要條件,在實驗室研究成熟的基礎上才能進行大工業生產。二者相同之處就是基本的實驗生產原理相同,不過實驗室研究的條件和精準度都比較高,得到微量的目的產物;而大工業生產主要利用儀器操作,得到大量的目的產品。

一. 研究背景

隨著人們對生物專業重視程度的增加,生物相關產業也逐漸發展起來,目前人們比較關注的就是生物製藥。在食品醫藥衛生領域,rna製劑是很有前景的乙個產業方向,如今市場上已有一些核糖核酸製劑產品出現。而微生物則是工業上大量生產核酸的原料,其中以酵母最為理想。

本次實驗就是酵母核糖核酸的提取及測定,通過實驗讓大家更了解物質分離純化的基本設計思想及操作細節。

二. 研究目標

提取rna的方法很多,工業上常採用稀鹼法和濃鹽法,本次實驗採取濃鹽法,通過對酵母的核糖核酸的提取,再用紫外吸收法測定,使學生掌握物質分離出暖的基本設計思想及主要操作細節。

三. 研究策略

提取rna使用濃鹽法,再用紫外吸收法測定rna和dna。

四. 研究方案及可行性分析

提取rna使用濃鹽法,在加熱條件下,利用高濃度的鹽改變細胞膜通透性,使rna釋放出來。再用紫外吸收法測定rna和dna,紫外吸收法操作簡便快速,雖易受蛋白質及含有共軛雙鍵物質的干擾,但其結果仍具有一定可信性。

五. 具體實驗設計

1. 材料和試劑

食品用乾酵母粉

10%nacl,6m hcl,95%乙醇,2%氨水,rna沉澱劑

2. 儀器

研缽,天平,沸水浴,冰浴

離心機,離心管,ph測量儀

紫外分光光度計,勻漿器,烘箱

3. 實驗操作

提取7g酵母粉酵母粉→研成粉末→轉移至三角瓶,50ml10%nacl溶液,使酵母粉徹底懸浮浸潤→沸水浴,40min→冰浴徹底冷卻,至少10min→3500轉/分離心30min→取上清液於小燒杯中,冰浴冷卻至10℃以下→一邊攪拌,一邊用6m hcl調節ph至2.0~2.5→繼續冰浴4h使沉澱充分→懸浮液充分攪拌→3500轉/分離心15min→傾棄上清液,95%乙醇在離心管中洗滌沉澱,3次,每次約15ml,3000轉/分離心10min→硫酸紙稱重,摺疊成框備用→將rna用乾燥藥勺去取出布於乾燥硫酸紙上→80℃烘箱 5min→精確稱重→將rna轉移至玻璃勻漿器→記錄剩餘製品和硫酸紙重量

測定繼上個步驟→5ml蒸餾水→沉穩垂直用勻漿杵勻漿至均一的rna膠體溶液→轉至小燒杯,10ml左右蒸餾水分次清洗勻漿器,併入小燒杯,切勿超過15ml→混勻,2%氨水調ph至7.0→轉入25ml容量瓶,用蒸餾水分次清洗小燒杯,併入容量瓶→定容混勻。→取兩支試管,按表一配製→冰浴20min→3500轉/分離心10min→取上清液於另兩隻試管,混合均勻→各取0.

5ml至兩個50ml容量瓶→蒸餾水定容→紫外分光光度計測定od260。

表一表二

核酸的酚抽提實驗報告

4.酶解液 200mmol l nacl,20mmol l tris cl ph8.0 50mmol l edta ph8.0 200 g ml蛋白酶k,1 sds。5.無dna酶的rna酶 將胰rna酶溶於10mmol l tris cl ph7.5 15mmol l nacl溶液中,濃度10mg...

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